双缩脲试剂就是指能与具有两个以上肽键的化合物发生红紫色显色反应的试剂。蛋白质，多肽是具有两个以上肽键的化合物，能与双缩脲试剂发生紫色反应，二肽和不能与双缩脲试剂发生紫色反应。

该试剂真正起作用的是硫酸铜，而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境，因此它可被其他碱，如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾，可延长试剂的使用寿命。