猫头鹰的食物以鼠类为主，也吃昆虫、小鸟、蜥蜴、鱼等动物。猫头鹰有吐“食丸”的习性，其素囔具有消化能力，食物常常整吞下去，并将食物中不能消化的骨骼、羽毛、毛发、几丁质等残物渣滓集成块状，形成小团经过食道和口腔吐出，叫食丸，也叫唾余。科学家可以根据对食丸的分析，了解它们的食性，发现食丸中存在小鸟的羽毛，断定猫头鹰是吃小鸟的。